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通常胶在30分钟到1小时内凝。如果凝的太慢,可能是TEMED,AP剂量不够。 如果凝的太快,可能是AP和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶。
前者主要原因是拔梳子用力不均匀或过猛所致;后者是由于在解除制胶的夹子后,板未压紧而致空气进入引起的,一般对电泳结果不会有太大的影响。
根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。
在较厚的凝胶中,由于凝胶不均匀冷却,中间部分凝固不好。
电泳系统温度偏高。
处理办法:待其充分凝固再作后续实验。
一般原因是两板之间的底部间隙气泡未排除干净,或聚合不完全。
处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
天一湖医者
可以考虑是一抗或者二抗浓度过高。
bamboopiggy
是你的玻璃板和胶之间有缝隙了。考虑换一下玻璃板
whilt-shirt
有可能是样本降解了,建议重新提蛋白
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