为什么WB的条带很模糊？

是不是样本已经降解了，重新制备一批新样本试试；也可以调节成像系统的相机焦距试试

曝光问题，可能是①曝光液配制比例错误；②曝光液没有均匀滴在膜上，导致条带灰度不均；③曝光时间过长导致膜上曝光液流失；④曝光板没有水平摆放。

蛋白问题，可能是①细胞提取的蛋白浓度太低或提取蛋白方法有误（如果内参也有问题则可能性大）；②转膜时间过短，蛋白未吸附；③电泳液或转膜液过期导致效率下降；③操作粗暴，把蛋白面的蛋白刮落。

抗体问题，可能是①浓度太低；②孵育时间过短；③抗体过期；④孵育时蛋白面朝下导致孵育不全；⑤孵育盒内抗体容积太少。

你说的情况可能是拖尾或者蛋白样品降解，前者原因在于一抗作用时间过长或浓度过高，后者是由于蛋白酶将目标蛋白分解成若千个蛋白，而这些蛋白同样可以被一抗识别，这时候可以添加蛋白酶抑制剂