whilt-shirt
主要是用Image J分析灰度值,将目的条带与内参的灰度值相比,就可以得到你目的蛋白的相对表达量
bamboopiggy
你说的应该是实验结果是条带的怎么分析吧?可以用软件,读取灰度值,然后与内参进行比较。软件麻烦的可以用image J,简单的直接用photoshop就可以。
dxywode
第一步我们先来看看第二泳道,我们能看见两条电泳带,一般的质粒在跑完电泳之后都会出现这种情况,因为质粒是很容易开的接着会变成线性或者是半线性和半环状的,环状的会比线性的跑的快。第二步我们再看下电泳带上面那条浅的也就是开链的质粒,再它的下面就是环状的质粒,不过这也不打紧,一般情况都是这样的。接着我们来看第三条,第四条电泳带,在靠近点样孔的就是你切掉了的目的基因质粒,这时就是线性的质粒,能看见比第二条电泳带跑的慢。然后可以得出因为环状的会比线性的跑的快一些。那么第四条电泳带下面的浅带就是我们要找的目的基因,它与PCR的产物大小一样。因此说明了我们要做的重组质粒容构建成功了,目的基因也已经连入了质粒。第一次做就能做成这样就算视成功了哦。
迟C迟
什么的电泳?
看条带是不是你要的大小,还可以用Image J分析灰度。
bqejjh123
如果你认为条带不清可以试试0.2%硝酸银染色后漂洗时间过长或漂洗过度,如果将漂洗时间控制在10s左右完成,每步均用去离子水漂洗,应该能好一些。一旦出现这种情况,可先用10%醋酸中止反应,再用去离子水洗弃中止液,然后进行硝酸银复染,重复漂洗、显影及中止反应步骤,一般仍能得到较为满意的效果,可省去再次电泳步骤。
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