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科研学霸天团,48小时有问必答
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请问细胞养了怎么去做qPCR和WB?
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怎么看慢病毒包装的效率如何?
164 围观
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MOI值受什么影响呢?
115 围观
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Sephadex LH-20溶胀后脱气泡一般脱多长时间啊?
108 围观
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一抗孵育时间,4度过夜还是常温2小时?
236 围观
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采用elisa试剂盒检测胞内蛋白,蛋白样品该如何制备?
132 围观
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问
临床上HPV检测会使用免疫学方法吗?
109 围观
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问
马尾神经损伤模型WB,神经裂解液之前需要去除神经膜,请问各位大神有什么建议?
57 围观
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问
怎么验证内源性两蛋白相互作用
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怎么验证两蛋白内源性相互作用啊
百泰派克-李工
验证两个蛋白之间的内源性相互作用可以通过多种生物化学和细胞生物学方法:1.免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP):这是一种常用的方法,通过使用针对一个蛋白质的特异性抗体来捕获该蛋白质及其可能的相互作用伙伴。如果另一个蛋白质也被沉淀下来,这表明两者之间可能存在相互作用。图12.亲和素纯化质谱(Affinity Purification-Mass Spectromet
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问
样品寄送过程,哪些需要低温?哪些需要干冰?哪些常温就可以?
百泰派克-李工
样品寄送的温度要求主要取决于样品的性质。下面是一些常见的样品类型及其相应的温度要求:1.生物样品(如血液、细胞、组织):这些样品通常需要在低温下运输,以防止细胞活性的丧失或分解。它们通常需要干冰或者液氮来保持低温。2.化学试剂:某些化学试剂在常温下可能会分解或反应,因此需要低温保存。根据试剂的具体性质,可能需要干冰或冷藏。3.药品和疫苗:许多药品和疫苗对温度敏感,需要在冷藏(2-8°C)或冷冻条件
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问
WB配上样体系怎么配呀
百泰派克-李工
Western Blot(WB)实验中的上样体系(Loading Buffer 或 Sample Buffer)通常包含几个关键成分:制备和使用方法:将以上成分按比例混合。可以根据需要调整总体积。通常将上样体系与样品按一定比例混合(例如1:1或1:3),然后在沸水浴中加热5-10分钟进行变性。加热后让样品在室温冷却片刻,然后加载到SDS-PAGE凝胶槽中进行电泳。
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问
请教,为什么我的PCDNA3.1空载体确定没有myc标签但是用myc标签抗体做WB能够打出来带子?
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大佬们,放射免疫沉淀的结果怎么解读啊
114 围观
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问
WB怀疑一抗没敷上,显影完每条带,还能重新敷一抗吗?
216 围观
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问
为什么细胞培养弃上清液,WB取上清液啊
94 围观
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问
烟草双荧光素酶成像方法
239 围观
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问
sumo融合蛋白为什么在镍柱上柱上酶切切不掉标签?
百泰派克-李工
这种情况可能由几个因素引起:1.酶的活性不足:使用的酶可能活性不高,或者已经失活。酶的活性可以受到多种因素影响,包括储存条件、温度、pH值等。建议检查酶的质量和储存条件,或者尝试使用新鲜的酶。2.酶的浓度不足:可能酶的添加量不足,无法充分与蛋白接触或者达到足够的酶切效率。增加酶的浓度可能有助于改善切割效率。3.不适宜的酶切条件:酶的切割效率可能受到反应条件的影响,如pH值、盐浓度、温度等。需要优化
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问
做实验经常失败,师兄师姐们是怎么调整心态。坚持下去的呢?
此用户已注销
我一般先把我的操作步骤和细节和师姐讲一下看看是不是自己哪里操作失误了没意识到。如果都没啥问题,那就会换一些试剂再试试。
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问
肝脏蛋白GAPDH容易降解
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