土井挞克树
可以使用trizol法进行rna提取
周末也要努力呀
使用最古老的方法浓度是一般最高的,也可以使用试剂盒纯度高但是浓度比不上Trizol法
小小翻车鱼
对于多糖、多酚含量较高的种子材料,传统的RNA提取方法如TRIzol法可能效果不佳。这种情况下,可以考虑使用以下几种方法来提取RNA:
1. 改良的CTAB法:改良的苯酚-氯仿-异硫氰酸钠(CTAB)法可以克服多糖、多酚等物质的干扰,提高RNA提取效率。具体操作方法是在提取过程中添加β-巯基乙醇(β-ME)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)以增加对多糖多酚的去除能力。
2. 柱状吸附法:柱状吸附法是一种选择性吸附核酸的方法。如Qiagen RNeasy柱状吸附法和Zymo Research RNA Clean & Concentrator柱状吸附法等。这些方法可以有效地去除多糖、多酚等杂质,提高RNA的纯度和质量。
3. 磁珠法:磁珠法是一种利用磁性纳米颗粒与核酸特异性结合的方法。如Thermo Scientific MagMAX和Bio-Rad磁珠法等。磁珠法可以在短时间内高效地分离RNA,同时可以有效去除多糖、多酚等干扰物质。
在使用这些方法提取RNA时,还需要注意以下几点:
1. 确保操作过程中的无菌环境,以减少微生物污染的风险。
2. 取样时要保证样品新鲜,避免样品的褐变和氧化。
3. 在提取过程中,可以加入RNase抑制剂以降低RNase活性,提高RNA的质量。
4. 在提取后的RNA质量检测中,使用琼脂糖凝胶电泳或高通量测序等方法来评估RNA的质量和完整性。
根据具体实验需求和设备条件,选择合适的RNA提取方法,以获得高质量的RNA样品。
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通过苯酚、氯仿抽提也可以除去一些多糖;此外还可以通过LiCl沉淀RNA将部分多糖留在上清液中。
huarenqiang5
一般选用直接研磨法和液氮研磨法进行RNA提取。
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