提取RNA扩增后质控起不来内标也起不来
dxy_a8e3x9ar
使用omega石蜡组织RNA提取试剂进行提取，提取完后测得RNA浓度为111.5ng/ul，纯度：2.04，逆转录后测得DNA浓度506ng/ul，纯度：0.93
样本内标质控起不来，弱阳质控都起来了
逆转录出了问题，会是什么问题呢，第二次部分样本能起来内标部分则什么都没有
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4 个回答
Topmicro
有帮助
检查一下用的引物是不是有问题。
Eason老歌迷
有帮助
还是提rna的问题，或者是你逆转录试剂的问题，就算你后面普通p出来了，后面做qpcr也不一定能行。
dxy_a8e3x9ar
谢谢，换了其他提取试剂做了对比，是omega提取试剂的问题提取虽然测得浓度纯度好像可以，但是效果不好，试剂没问题。
dxy_gwrp7ndq
有帮助
假如连续两次内标无扩增，考虑该孔温度异常或荧光信号采集异常，需要进行校准或报修。排除以上情况后，对原标本复检，若内标正常可以正常发报告；若内标仍然无扩增，则需重新采样复检。
whilt-shirt
有帮助
有可能是逆转录中的gDNA对实验产生了影响，也有可能是内标引物问题
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