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丁香通

pcr的平台期为什么越跑越低?

相关实验:细胞因子检测

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一棵树哦

小菜鸟最近在跑pcr,同一个样品想把errorbar跑低一点,但是跑了几次之后发现平台期越来越低,ct值却是正常的......网上看了一些图比如说是同一个样品重复90次啊这种的,发现人家的图的平台期也是高低不一的,这是为什么呢?求教,非常感谢

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2 个回答

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loveliufudan

有帮助

PCR反应的平台期的高低受到许多因素的影响,包括PCR反应体系中的成分、放大区域、反应条件等等。在同一个样品内,重复跑PCR会有平台期高低不一的情况,这可能是由于样品的质量和含量的差异,反应条件的变化,PCR反应体系的变化等因素导致的。此外,error bar的大小也受到许多因素的影响,例如PCR反应的可重复性、PCR引物的设计、模板DNA的质量等等。因此,要使error bar变小,需要优化PCR反应条件、引物设计等方面的因素,以减少PCR反应的变异性。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可能是基线范围设置不当,这种一般是由于模板量过高导致的。建议减小基线的终点值。

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