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菌液PCR有条带,但是送测序提质粒无条带?

相关实验:巢式 PCR

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哦呦呦呦321

基因片段长888bp,用的是黏性末端连接17分钟,然后转化放在Amp+板上,菌液PCR有很明显的条带,但是送测序之后人家说提质粒无条带,是什么原因呢?

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5 个回答

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朵朵可可果果

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菌夜转入大肠埃希,所以才会不显示

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bamboopiggy

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你菌落pcr有条带只能说你pcr成功有条带,并且这个条带转入了大肠杆菌,但是没有连接成功

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huarenqiang5

有帮助

有可能是引物特异性不好或者细菌细胞杂质所带来的假阳性,建议测序分析模板用提取的核酸做模板,或者请重新设计引物 或采用巢式PCR。

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balalaLy

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也有可能是测序公司的问题,或者是送的菌液的问题。我试过同一批菌液,挑菌后只摇了三小时取一半的菌液送测序,剩下的菌液加LB继续摇过夜后保种,结果测序结果也是没有信号。后来把保种的又重新涂板挑菌送测序结果就对了。

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土井挞克树

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考虑还是转质粒没有成功,才会提取不出来。

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