为什么QPCR结果中内参某一样本的CT值极高，达到了28点几，其它样本的均小于20

要看这个样品的质量和浓度怎样，如果质量差或浓度过高，都会导致这样的结果！

最好重复一下实验，可能那个样本本身有问题，也可能是内参的问题，同时做两种内参对比看看

可能原因：

1，内参引物效果不佳：可能原因是引物设计存在问题，比如存在引物二聚体等；另外，也有可能是引物使用时间过久或者保存不当，出现了降解。

2，RNA质量不好，比如260/280, 260/230值偏低；

3，反转时RNA含量过低；我们反转20uL体系一般用1ug RNA；

4，定量时cDNA以及引物含量偏低；

那是你内参引物设计的问题，一般内参ct值就16-18左右。