相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)
cubeamy1905
2022-11-17
是这样的,我使用了三种鼠源细胞来筛选shRNA,用的lipo3000 ,前后做了5-6次,每次都是对照组曲线正常,但转染shRNA的组曲线要不就是起峰过早,要不就是弓背形,而且内参和目标的曲线是一致的,都跑不出来。这套提rna-逆转录-qpcr的体系应该是没问题的,之前做别的细胞样本都正常能跑,引物也没问题,溶解曲线正常。请问有可能是因为什么原因呢?
毛利小五郎的徒弟
2022-11-18
重新设置基线,调整浓度再测一次。
juyue2010
样本中目的基因浓度太高,需要增加稀释倍数
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qPCR实验内参的值都比目的基因的值大,这正常吗。
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