家人们！为什么跑q一直跑不出来啊，应该不是cDNA不行，actin一直很齐

1.引物设计的可能有问题

2，退火温度不正确

恐怕还是cDNA的问题,actin因为量比较丰富,所以即使破坏一些仍能P出来,但你的目的基因就不同了

actin的Ct值正不正常？如果actin ct虽然齐但是比较高，就有可能是酶的问题。如果不是，酶和cDNA都没有问题，就要考虑是不是目的基因的引物问题。还有退火温度是不是得调整。