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扩增曲线没有到达平台期可以么,会影响分析么,需要一定有平台期么?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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飞来1988

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5 个回答

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凌晨三点Dxy

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起始模板浓度太低,或循环数不够,当然循环数一般参照说明书不会有大问题,而且循环数多了会增加非特异性扩增

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bamboopiggy

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如果扩增曲线没有到平台期,那只能说明你的基因的丰度低,可能误差会很大。

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luoyukejing

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一般是需要有平台期,如果没有,会有一定的影响

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Eason老歌迷

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肯定是要有平台期的啊,没有平台期肯定会影响啊!是不是你的起始模板浓度太低了,即便经过你设定的循环也是达不到平台期的,可以通过增加循环数来验证是否是该问题。

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天一湖医者

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扩增曲线的平台期不是必须的,判定实验结果好坏的指标应该是扩增效率是否在可接受范围内。如果扩增效率过低,则需要考虑优化反应体系,例如摸索最适合的引物探针浓度,退火温度,离子浓度等等,必要的情况下可以重新设计合适的引物探针;如果扩增效率过高,则可能是梯度稀释加样不准确或者反应体系中存在一些抑制物,如样品中的肝素,乙醇残留等。这种情况就需要进一步纯化模板或者重新提取样品。

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