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做pcr的时候曲线没有峰值,出来的数每个孔差异很大,怎么解决

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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酸奶悠悠

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

1.确定机器是好的,2,确定引物能用 ,3加样的枪和枪尖要match

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汤姆卜丽波

有帮助

如果曲线没有峰值的话那说明你的样品引物都有问题,差异大加样也有问题,单一变量找一下问题究竟在哪

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秋秋欣欣

有帮助

一般每加温一度,读一次信号,当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多,曲线的横坐标是温度,纵坐标是荧光信号的变化,开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的。

每个空差异很大的话可能是你加样不准,加样前可以混一下样品,或者再稍微多做两个复孔

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