相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)
Eason老歌迷
2022-06-06
bamboopiggy
注意annealing temperature,可以适当提高
迟C迟
1、设计特异性引物,这是避免非特异性条带最关键的点。
2、提高退火温度,可提高目的条带特异性。
3、PCR产物切胶回收,可得到特异性目的条带。
未来9
必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。
天一湖医者
提高退火温度,添加DMSO,冷启动,touchdown,更换更特异的引物,
相关产品推荐
大肠杆菌 Poly(A) 聚合酶,阿拉丁
¥1544.90
SuperRT One Step RT-PCR Kit,阿拉丁
¥1797.90
二代M-MLV逆转录单酶,阿拉丁
¥1441.90
化学法热启动DNA 聚合酶,阿拉丁
¥3707.90
重组高热稳定DNA 聚合酶,阿拉丁
¥514.90
相关问答
问
RT-PCR引物是从文章中找还是自己设计?
real-time PCR 与 reverse-transcription PCR 有什么区别?
关于内参,究竟如何加?
相关方法
RT-PCR实验步骤
2024-05-14
RT-PCR技术
2024-05-13
PCR 反应体系与反应条件、Taq 酶的选择、循环参数的设定
2023-05-25
推荐阅读
电泳条带总是跑不好?
为什么pcr引物中GC含量过多易出现非特异性条带