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跑pcr,怎么避免非特异性条带

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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Eason老歌迷

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4 个回答

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bamboopiggy

有帮助

注意annealing temperature,可以适当提高

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迟C迟

有帮助

1、设计特异性引物,这是避免非特异性条带最关键的点。

2、提高退火温度,可提高目的条带特异性。

3、PCR产物切胶回收,可得到特异性目的条带。

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未来9

有帮助

必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。

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天一湖医者

有帮助

提高退火温度,添加DMSO,冷启动,touchdown,更换更特异的引物,

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