为什么pcr引物中GC含量过多易出现非特异性条带
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GC含量高,说明解链温度高,目的条带在较高温度才会解链,而在未达到解链温度时,引物会以未完全解链的DNA为模板,进行PCR非特异性扩增,所以易出现非特异性条带。降低退火温度 ,DNA复性减缓,增加非特异性互补机会,使非特异性条带增多。
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GC含量高,说明解链温度高,目的条带在较高温度才会解链,而在未达到解链温度时,引物会以未完全解链的DNA为模板,进行PCR非特异性扩增,所以易出现非特异性条带。降低退火温度 ,DNA复性减缓,增加非特异性互补机会,使非特异性条带增多。
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