关于内参，究竟如何加？

内参就相当于对照，和实验组一样PCR，区别就是实验组加cDNA和primer，而内参只加primer，用DW代替cDNA，剩下的操作都是一样的

如果是做mRNA逆转录分析，内参最好选定，表达恒定的基因，如GAP

你把内参看成是第三个基因,与A 基因、B基因一道做就是了。

内参不是加进去的 是两个细胞比即处理或者检测细胞（A）和对照细胞（B）都稳定表达的基因。一般选择actin-beta等，可以修正对比处理细胞或者检测细胞（A）与对照细胞（B）之间的检测基因的表达差异的倍数。如果效率为100%即每次都是以2的比率递增，则采取2△Ct(△Ct)的方式计算。△Ct(△Ct)即为A细胞的检测基因的Ct-内参基因的Ct的值 与 B细胞检测基因的Ct-内参基因的Ct值 做差.如果效率不是100% 即以小于2的比率递增（A的比率为a1,B的比率为b1)则为a1^△Ct除以a2^△C即可得到表达的相应倍数。其实我觉得你要是想完全看清楚的话  推荐你看一下biorad的关于q-PCR的指南 里面说的很清楚  你可以去biorad的网站下 丁香园文档上面也有~

 是的，就看做同样的样品中的第三个基因就行了，等于你是做了ABC三个基因，只不过C就是你的内参基因，不是加在A、B里面哈

你可以把内参看做第三个基因，A.B怎么做的，他也一样就行了。