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【求助】菜鸟求助:如何加阻断剂

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刚刚开始做信号通路,激活和阻断后测相关分子

1、阻断剂配成需要浓度,加入六孔板,一小时后把所需激动剂贮存液直接加到六孔板中(感觉这样会浓度不均),24小时后检测

2、阻断剂配成需要浓度,加入六孔板,一小时后去除,配好同时含有阻断剂和激动剂的工作液,加入各孔,24小时后检测

3、阻断剂配成需要浓度,加入六孔板,一小时后去除,加入配好的所需浓度的激动剂工作液(不含阻断剂),24小时后检测

不知说清楚了没,这三种方法哪种对啊,或者到底应该怎么做,谢谢大家帮助啊
第2种是可以,但是感觉有些浪费阻断剂。
你配阻断剂和激动剂时完全可以配的浓度高些,如所需终浓度是1ng/ml,你可以配成1ug/ml,使用时1:1000稀释,就是如果是1ml的培养体系,只需加1ul的激动剂或者阻断剂就可以了,这样不会改变培养体系的体积,也就不会改变原来加的阻断剂的浓度。
kern6549 wrote:
第2种是可以,但是感觉有些浪费阻断剂。
你配阻断剂和激动剂时完全可以配的浓度高些,如所需终浓度是1ng/ml,你可以配成1ug/ml,使用时1:1000稀释,就是如果是1ml的培养体系,只需加1ul的激动剂或者阻断剂就可以了,这样不会改变培养体系的体积,也就不会改变原来加的阻断剂的浓度。

我是这样配的,配成高浓度贮存液,用时稀释,就是怕直接把贮存液加进去后浓度不均
谢谢啦

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