目的基因片段电泳鉴定无结果是为什么？

1.先对比引物序列，看序列是否真的评分很高（文献的也要自己重新查，文献审稿时引物错误是没人挑的）2.引物质量很重要，PCR不出结果，可以不付帐。换一家试试。有的公司引物合成时好时坏。3.引物的保存不当。4.PCR体系中有强的抑制Taq的物质（抽提污染或水的质量不高）5.是否有引物二聚体？有的话证明PCR还在进行，但条件不好。如果没有证明PCR没进行。6.dNTP降解也有可能。7。ULYSSEESWB说的很对可以试试touchdown，但根本没有带是不行的。PCR仪的问题或电泳的问题要排除。8.模板有问题也是可能的。逆转录PCR的引物尽量接近寡聚a的尾巴，不要离尾巴超过1500bp（有些逆转录酶能超过2500bp，但1500bp比较保险些，如能1000bp以内最好）。至于阳性对照未出，比较诡异（不排除公司的阳性模板有问题）

首先，是模板质量，B-actin丰度高很容易扩增，如果你目的基因丰度低或很长，反转出来的cDNA含有目的片段很少甚至残缺，导致无法有效扩增出目的片段，所以模板质量很关键。第二，“电泳无结果显示（包括阳性对照的cDNA）”，阳性对照cDNA不是质粒吧？如果模板是质粒都扩不出来，那就有点过了。。。常规建议看新的文献查引物（别看中文的），提高反转质量，降低Tm（45），有很多杂带用touchdown。非常规建议，换个PCR仪，换个人做试试。。。