pcr扩增问题有很多问题？
未来L04X
- 每三个是一对引物，上面是6对引物，没有一对是跑出来的，都是什么问题啊，做过一次了，和之前结果差不多，在之前的问题上改进了反应体系（引物增加）还有反应程序啥的，还能怎么改进吗，反应程序变性15s，退火20s，延伸1min
- 是常规的pcr扩增，反应体系有DNA模板，上下游引物，dd水，mix
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4 个回答
高山云初
有帮助
要提高退火温度，其次延伸时间也得长些
周末也要努力呀
有帮助
可能酶降解了样本，换取无酶水加样。
开水白菜zjl
有帮助
- 首先你要搞清楚这些条带中有无你的目的条带
- 如果有目的条带，出现了非特异性扩增，则需要提高退火温度，退火温度可通过梯度pcr来优化
- 如果没有出现目的条带，则应考虑反应体系的问题，如模板浓度、引物问题等
毛利小五郎的徒弟
有帮助
退火时间长一些，延伸时间也长一些
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