pcr扩增目的条带上有一条淡淡的条带？

应该是由于引物特异性不足引起的错配，导致扩增出目标条带以外的条带

淡淡的条带主要是污染的问题，去除污染就好了

是引物和模板的问题了.要好好看看引物特异性好不好,dimer亮不亮,(自身发夹一般不会有太大影响)模板的话,要看看GC含量高不高,模板质量好不好.引物不好只能重新设计.模板不好可以加点DMSO。

这是形成的引物二聚体，可以不用管。你可以把你的引物在NCBI的prime-blast上比对一下，看下引物的互补性。可能是引物浓度过高和退火温度不适引起。

浓度过低，时间过短都有可能，增加上样浓度试一下