未来L04X
土井挞克树
考虑是模版的问题,建议更换模版后再做
huarenqiang5
考虑以下几点原因及建议:
1、酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。
2、模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。
3、变性温度是否准确。PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。
4、反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶。应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。
5、引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。
高山云初
可能是模板的问题,提取不完整,其中不含你的目的基因,或目的基因含量太低。
相关产品推荐
相关问答