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最近在做双荧光素酶验证miRNA是否与靶基因的3UTR结合,目前有个疑问,在进行转染时准备使用lipo2000,在24孔板中进行实验,在转染时需要报告载体和miRNA模拟物一起转进细胞,那么在转染报告载体时,是分别配置两个体系将报告载体和miRNA转进去,还是只配置一个载体体系,直接将报告载体与miRNA混合加入就可以了呢,如果是配置两个体系,会不会着转染试剂对细胞的伤害很大呢。
谢谢大家,有可以帮忙解答的吗
loveliufudan
在进行双荧光素酶验证miRNA是否与靶基因的3UTP结合实验时,您可以选择将报告载体和miRNA模拟物分别配置两个体系进行转染,也可以将它们混合在一起加入转染试剂中。这取决于您的实验需求和转染试剂的使用说明。
如果您选择将它们分别配置两个体系进行转染,可能需要更多的转染试剂,但是可以控制每个体系中报告载体和miRNA的比例,从而减少不必要的干扰。同时,这种方法也可以避免miRNA与转染试剂或其他物质之间的相互作用,提高实验的准确性。
如果您选择将它们混合在一起加入转染试剂中,可以减少转染试剂的使用量,但需要注意混合比例的准确性,避免miRNA与转染试剂或其他物质之间的相互作用。如果转染试剂的使用说明中没有特别说明,这种方法也是可行的。
土井挞克树
是分别配置两个体系将报告载体和miRNA转进去
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