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【求助】BamH1、Sac1双酶切重组质粒(目的基因+pMD19T)电泳结果的疑问

相关实验:DNA 的酶切与连接

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Cockta

我的目的基因917bp,pMD19T 2692bp,质粒①②③是连接产物转化E.coli DH5α感受态涂布Amp+平板37℃培养过夜后挑取的三个不同单菌落分别转板两次后提取的质粒(提取的质粒浓度低)。

对质粒①、③双酶切(泳道4/10、6/11)的结果好困惑啊,泳道4、6、10、11里非常微弱的第二条带的位置和泳道2、9的位置看着一样,像是质粒被双酶切后的T载,那它上面的第一条带是啥?被单酶切后的线性质粒或者开环质粒?有人遇到过这种情况吗?可以解答一下吗?

1:M 2:质粒②双酶切 3:质粒② 4:质粒①双酶切5:质粒① 6:质粒③双酶切 7:质粒③【37℃ 3h】

8:M 9:质粒②双酶切 10:质粒①双酶切 11:质粒③双酶切 12:质粒② 13:质粒① 14:质粒③【37℃ 4h】

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2 个回答

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土井挞克树

有帮助

出现这个结果说明开环质粒可能存在裂解

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juyue2010

有帮助

第一条带是为切开的超螺旋质粒的条带

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