原理
核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。
材料与仪器
λDNA EcoT14I:由11条DNA片段组成
T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖
电泳仪 水浴锅 移液器 微波炉 成像设备
T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖
电泳仪 水浴锅 移液器 微波炉 成像设备
步骤
1.取200ul离心管按下表加入试剂。
2.混匀后点动离心,将溶液甩至管底。
3.置于已调好温度为12℃-14℃水浴锅(或PCR仪)中。
4.保温2h后取出。
5.电泳检测。
λ/EcoT14 I 样品 10ul(兼作 DNA Marker)+ 10X的loading buffer
DNA连接样品:10 ul + 10X的loading buffer 2 ul
6.DNA连接片段的电泳预期结果。
来源:丁香实验