重组质粒单酶切后转入酵母菌X33，菌落长出来了很多的但是做菌落PCR却都不对，为什么

考虑是有杂菌污染，优势菌繁殖不明显。

可能的原因：

1.细胞是否失活：可以在下次实验时加入阳性对照组，向同批感受态细胞中转入阳性质粒以确认其活性；

2.抗性药物是否错误：重新确认一下重组质粒的抗性，以免用错抗性药物进行菌落筛选，导致不长菌；

3.载体是否正常工作：可以向载体中连入其它已成功连接过的短片段，转化感受态后观察其菌落生长情况，以确定载体是否正常工作。