WB中110KDa的蛋白怎么跑？
相关实验：用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验
豆本豆呀
各位大神，我最近一直在跑一个叫LSD1的蛋白，是核蛋白，我用的是小鼠大脑皮层组织，但一直没有条带，膜上很干净，不知道是哪里出了问题，内参是有的，就是没有目的蛋白，我是80V跑两小时，转膜是200mA，130分钟。还请各位大神指导谢谢！
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3 个回答
Eason老歌迷
有帮助
配胶可以选浓度小一点的，因为你是跑大蛋白。先用50v跑，出浓缩胶后，换成120v跑。跑完转膜可以拿湿转，110属于大分子，转的时间稍微长点。效果会很好。
豆本豆呀
好滴谢谢，我延长点转膜时间试试
whilt-shirt
有帮助
可以选用8%的胶，适当增加转膜时间
豆本豆呀
好的谢谢，我再试试
balalaLy
有帮助
marker有没有转过去？有的话就可能是蛋白表达低或者没有提取出来，再就是抗体的问题。核蛋白提取建议在普通膜蛋白提取的同等条件下延长裂解时间。我试过提一个核蛋白裂解2.5h的，时间短根本做不出来条带
豆本豆呀
好的谢谢，marker都是有的，我再试试延长裂解时间，谢谢啦
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