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请问有人在用CAR慢病毒转染Jurkat 细胞吗?为什么转染之后扩增这么难,还死了一大片。

相关实验:全基因组CRISPR-Cas9基因敲除和转录激活筛选实验

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dxy_8kixnkc

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2 个回答

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天一湖医者

有帮助

注意无菌操作就行了。要求转染过程中无血清、无抗生素。

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Eason老歌迷

有帮助

正常,这跟细胞上病毒受体表达的多寡以及细胞的抗病毒能力有关,这两个原因一般无法克服。给提供几个常见的解决方法。一个是加助侵染试剂。二是浓缩病毒,4摄氏度,10K蛋白截留柱离心浓缩,提高病毒滴度后在感染,可以提高感染阳性率。三是分选阳性细胞,一般情况下,慢病毒感染Jurket、THP1这种有免疫能力(指的是分子免疫抗病毒能力)的细胞,基本上不可能做到100%感染,如果你感染以后有分选标签,做一个流式细胞分选,把阳性细胞收集起来,扩起来。

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