丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

转染细胞全死了的原因

互联网

6301

问:

构建逆转录病毒为载体的DNA(质粒),阳离子脂质体2000(过期的),转染病毒包装细胞pt67,G418筛选,在换液和传代过程中均会有细胞死亡(贴壁细胞漂浮)。求教原因。

换液3.6ml DMEM+0.4ml新生牛血清+24μlG418

传代用胰酶ph 7.2,1ml,用0.3ml新生牛血清中和,800rpm离心5min,弃上清,加入上述培养液。

答:

做一下G418浓度筛选,另外你的对照组未转染的细胞经同样浓度G418筛选后怎样呢?是否本来细胞状态不好?或是根本没有转进去呢?还有就是脂质体本身对细胞就会产生一定的毒性,综合几个方面再做一次转染试试看!我们做转染时候通常G418都是作梯度筛选的。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序