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蛋白表达不出来

相关实验:质粒 DNA 大量制备实验

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dxy_z5a5ngg5

去年十二月找公司合了质粒并转了BL21甘油菌,iptg诱导表达很成功,但是从今年五月开始,同样的步骤跑胶发现目的蛋白不表达了,挑平板活化后诱导也是,求大佬帮忙分析指导一下,万分感谢!!

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5 个回答

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bamboopiggy

有帮助

先提一下质粒送测序,确定你的质粒还在

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天一湖医者

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1.质粒是否成功转化到你的宿主菌。

2.改变诱导时机和诱导剂浓度,一般当OD值在0.5-0.6时较好。

3.也许蛋白已经表达,只是不是已可溶形式表达的。

4.也许是蛋白表达过低,SDS-PAGE不能发现。

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balalaLy

有帮助

菌体的状态和诱导剂都会有关系,不同批次的诱导剂有时效果会差很多

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府宅

有帮助

可能是有杂菌污染,导致蛋白表达不出

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

可能是高浓度IPTG会抑制蛋白表达,会生成包涵体

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