迟C迟
如果是单酶切,线性DNA应该比环装DNA大。
如果是双酶切,应该有多条带,比环装DNA小。
天一湖医者
第二个问题,如何判断酶切效果。无论是PCR还是载体都无法通过电泳判断是否酶切完全,所以不好进行连接呀?对于PCR产物一般会采取这样的策略,将产物首先连接到T载体上,然后再用设计好的双酶切,电泳回收切下的条带,这样就能确保得到的是完全酶切的产物。载体判断比较麻烦,要看载体本身、多大双酶切为点之间的条带有多大、双切前后的大小是否能通过电泳区别出来,但是双切位点一般都在标记基因里面,所以插入片段的载体会在后期转化可以后区分开,所以也没有太大必要确定他是否完全,只要充分酶切就好了。
汤姆卜丽波
类似于这种。3泳道和2泳道酶切前样品的比较,很明显的切开了
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