汤姆卜丽波
这种情况先确定你的模板纯度,然后引物是否匹配,退火温度和循环数可以做梯度摸索
bamboopiggy
换引物,更改pcr程序,尤其是annealing temperature,或者是用touch down pcr 来跑,或者是加入Mg2+或DMSO
天一湖医者
可能存在的原因:
移液器校准不良或移液技术差。
不正确的稀释导致标准曲线出现错误。
染料浓度低荧光或者仪器未校准染料。
引物设计不好或扩增子具有二级结构。
标准曲线动态范围太小。
Taq酶无活性或活性降低。
样品抑制。
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