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pcr扩增效率E表现不好怎么办?

相关实验:多药抗药基因的表达实验

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ksclxn_456

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3 个回答

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汤姆卜丽波

有帮助

这种情况先确定你的模板纯度,然后引物是否匹配,退火温度和循环数可以做梯度摸索

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bamboopiggy

有帮助

换引物,更改pcr程序,尤其是annealing temperature,或者是用touch down pcr 来跑,或者是加入Mg2+或DMSO

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天一湖医者

有帮助

  可能存在的原因:

  移液器校准不良或移液技术差。

  不正确的稀释导致标准曲线出现错误。

  染料浓度低荧光或者仪器未校准染料。

  引物设计不好或扩增子具有二级结构。

  标准曲线动态范围太小。

  Taq酶无活性或活性降低。

  样品抑制。

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