bamboopiggy
如果是完整质粒,应该是超螺旋的,跑的最快。但是感觉你这个lane像是开环带,就是双链dna有一条断开了,拖着尾巴,跑的慢。lane2 是线性带,跑的比开环带要快。
灵枢天问
酶切之后,就不是线性化的质粒了,就成了线性化的片段,再加上bp小了,电泳就会快一点
汤姆卜丽波
因为酶切之后片段大小变了啊,变小了,就跑得快了。
未来9
可能是你提取质粒时动作过大,破坏了超螺旋状态的质粒。建议重新提取质粒(操作要温柔)试试。
天一湖医者
1、琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关,分子构象越大,摩擦阻力越大,第一条带是超螺旋带应该最亮,因为超螺旋结构完整紧密,跑得最快。
2、第二条带为线性质粒是双链都断开变成松弛的线性DNA,不如超螺旋紧密,跑得相对慢 。第三条带为开环质粒,DNA双链的其中一根断开,导致超螺旋能量被释放而使质粒变成松弛的环状结构,结构臃肿,跑得最慢。
3、由于摩擦阻力的问题,琼脂就像有孔海绵分子筛,细菌质粒提取中电泳会出现三条带,最快的是超螺旋带,它是完整的,因为它的构型紧密,跑得快。
4、 第二条带在中间,是线性带,即环状双链DNA 两条链均断开,其分子构象变为线性,不如超螺旋紧密,跑得就慢一点。最慢的是开环带,即环状双链DNA 有一条链断开,拖着一条尾巴,显得很臃肿,所以跑得最慢。
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