丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

双酶切之后,为什么线性化质粒比环状质粒跑得快?

相关实验:DNA 的酶切与连接

user-title

dxy_jrj59zn3

wx-share
分享

5 个回答

user-title

bamboopiggy

有帮助

如果是完整质粒,应该是超螺旋的,跑的最快。但是感觉你这个lane像是开环带,就是双链dna有一条断开了,拖着尾巴,跑的慢。lane2 是线性带,跑的比开环带要快。

user-title

灵枢天问

有帮助

酶切之后,就不是线性化的质粒了,就成了线性化的片段,再加上bp小了,电泳就会快一点

user-title

汤姆卜丽波

有帮助

因为酶切之后片段大小变了啊,变小了,就跑得快了。

user-title

未来9

有帮助

可能是你提取质粒时动作过大,破坏了超螺旋状态的质粒。建议重新提取质粒(操作要温柔)试试。

user-title

天一湖医者

有帮助

1、琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关,分子构象越大,摩擦阻力越大,第一条带是超螺旋带应该最亮,因为超螺旋结构完整紧密,跑得最快。

2、第二条带为线性质粒是双链都断开变成松弛的线性DNA,不如超螺旋紧密,跑得相对慢 。第三条带为开环质粒,DNA双链的其中一根断开,导致超螺旋能量被释放而使质粒变成松弛的环状结构,结构臃肿,跑得最慢。

3、由于摩擦阻力的问题,琼脂就像有孔海绵分子筛,细菌质粒提取中电泳会出现三条带,最快的是超螺旋带,它是完整的,因为它的构型紧密,跑得快。

4、 第二条带在中间,是线性带,即环状双链DNA 两条链均断开,其分子构象变为线性,不如超螺旋紧密,跑得就慢一点。最慢的是开环带,即环状双链DNA 有一条链断开,拖着一条尾巴,显得很臃肿,所以跑得最慢。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序