双酶切插入目的基因的方向
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是采用pET28a+质粒，HindIII是173，NdeI是238。 上游引物酶切位点是NdeI 下游引物酶切位点是 HindIII，经过PCR扩增以后，发现目的基因片段连到质粒上必须是反的才可以，正向连不上去。可是我查阅的文章目的基因反着插到质粒去。
别人的文章，不单单是这一篇，好多目的基因片段的方向和质粒的方向相反的
2 个回答
周周zyl
有帮助
双酶切插入目的基因的方向是反相的，多调整几次，应该就可以了，但顺序不能搞错。
土井挞克树
有帮助
可以反向插，你记住插入的顺序，后续分析的时候做调整就行
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