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双酶切插入目的基因的方向

相关实验:DNA 的酶切与连接

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dxy_tphcsz00

是采用pET28a+质粒,HindIII是173,NdeI是238。 上游引物酶切位点是NdeI 下游引物酶切位点是 HindIII,经过PCR扩增以后,发现目的基因片段连到质粒上必须是反的才可以,正向连不上去。可是我查阅的文章目的基因反着插到质粒去。

别人的文章,不单单是这一篇,好多目的基因片段的方向和质粒的方向相反的

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2 个回答

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周周zyl

有帮助

双酶切插入目的基因的方向是反相的,多调整几次,应该就可以了,但顺序不能搞错。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以反向插,你记住插入的顺序,后续分析的时候做调整就行

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