【求助】质粒双酶切电泳图长成这样切胶纯化后能做连接吗
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大家能不能帮我看看这张质粒双酶切的电泳图,上方边缘怎么会这么毛糙,本来是要切胶纯化后作插入目的片段的,怕会影响后面的连接,所以没纯化!已经出现两次同样的状况了,之前做的时候都还是很干净的一条带,不知道是怎么回事啊!载体是pGL3-Basic,酶切位点Mlu I和Xho I,酶切2小时后,1%琼脂糖凝胶电泳,80v电压45min。大家快来帮帮我吧
我最近也在做双酶切连接,做了好几次都出不来,我的问题是酶切片段的亮度和你的Marker差不多,酶切之后还放了一天才做的,也不知道这次能不能做出来。
你的胶本身就不是很好吧,要不怎么Marker都是歪的,再跑一次试试,另外一个可能是纯化不干净
你的胶本身就不是很好吧,要不怎么Marker都是歪的,再跑一次试试,另外一个可能是纯化不干净
哦,弄错了,不好意思!你的质粒提取出来有没有跑电泳啊?
没酶切的质粒之前跑过电泳,条带很干净,我是怕会不会是酶的问题,我后来又酶切了一次,情况一样,我就将就把酶切产物纯化了,死马当成活马医,今天转化,看明后天的结果如何了
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