【求助】质粒双酶切电泳图长成这样切胶纯化后能做连接吗
丁香园论坛
4131
大家能不能帮我看看这张质粒双酶切的电泳图，上方边缘怎么会这么毛糙，本来是要切胶纯化后作插入目的片段的，怕会影响后面的连接，所以没纯化！已经出现两次同样的状况了，之前做的时候都还是很干净的一条带，不知道是怎么回事啊！载体是pGL3-Basic，酶切位点Mlu I和Xho I，酶切2小时后，1%琼脂糖凝胶电泳，80v电压45min。大家快来帮帮我吧
我最近也在做双酶切连接，做了好几次都出不来，我的问题是酶切片段的亮度和你的Marker差不多，酶切之后还放了一天才做的，也不知道这次能不能做出来。
你的胶本身就不是很好吧，要不怎么Marker都是歪的，再跑一次试试，另外一个可能是纯化不干净
你的胶本身就不是很好吧，要不怎么Marker都是歪的，再跑一次试试，另外一个可能是纯化不干净
哦，弄错了，不好意思！你的质粒提取出来有没有跑电泳啊？
没酶切的质粒之前跑过电泳，条带很干净，我是怕会不会是酶的问题，我后来又酶切了一次，情况一样，我就将就把酶切产物纯化了，死马当成活马医，今天转化，看明后天的结果如何了
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
