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如果你的marker也有问题,极大可能是你制作凝胶或电泳的缓冲液有问题.请仔细检查是否为1X TE buffer.再次,请使用新鲜的agarose gel进行电泳,如果保存时间过长(即使是在4摄氏度下),胶体也会出现问题.
府宅
检查你的agarose gel浓度.一般以0.8%为标准(0.8g琼脂糖+100ml TE buffer).如果你的目标片段较小(小于100bp),请适当提高凝胶浓度(1.2%-1.5%)
天一湖医者
原因可能有以下:
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
3、可能是原液浓度太大造成的;
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
未来9
PCR跑出来的条带比较弥散原因:
1、PCR体系中存在污染
2、电泳槽中电泳缓冲液不净
3、电压不稳定
4、如果PCR的模板是经过酒精提取的质粒等相关DNA,则酒精没有除净
5、退火时间过长或过短,延伸时间过短等
bamboopiggy
跑出来的marker弥散不弥散?是不是你灌胶没有灌好?还是跑胶的液体有问题?
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