DNA 体外重组

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

DNA 体外重组，又称基因克隆，是基因操作中最基本的技术，也是分子生物学的核心技术。DNA 重组技术，是指应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的 DNA）与载体 DNA 接合成一具有自我复制能力的 DNA 分子-复制子（replicon），继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子，其基本流程图解示意如下：

原理

DNA 体外重组 ( DNA recombination in vitro) 的基本原理是将 2 个或 2 个以上 DNA 分子通过体外连接、体内克隆扩增的方法组成一个新 DNA 分子的过程。

应用

DNA 体外重组是构建基因文库、外源表达基因、基因改造即基因定点诱变等重要的中间过程。

来源：丁香通实验团队

操作方法

DNA 体外重组

DNA 体外重组，又称基因克隆，是基因操作中最基本的技术，也是分子生物学的核心技术。DNA 体外重组包括：欲进行重组的 DNA 片段（常称为目的 DNA) 的获取；载体的选择及准备；目的 DNA 片段与载体的连接；重组 DNA 导入宿主细胞；含重组 DNA 宿主细胞的克隆化及鉴定。