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DNA 体外重组

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

DNA 体外重组,又称基因克隆,是基因操作中最基本的技术,也是分子生物学的核心技术。DNA 重组技术,是指应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的 DNA)与载体 DNA 接合成一具有自我复制能力的 DNA 分子-复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子,其基本流程图解示意如下:


原理

DNA 体外重组 ( DNA recombination in vitro) 的基本原理是将 2 个或 2 个以上 DNA 分子通过体外连接、体内克隆扩增的方法组成一个新 DNA 分子的过程。

应用

DNA 体外重组是构建基因文库、外源表达基因、基因改造即基因定点诱变等重要的中间过程。

来源:丁香通实验团队

操作方法

DNA 体外重组

DNA 体外重组,又称基因克隆,是基因操作中最基本的技术,也是分子生物学的核心技术。DNA 体外重组包括: 欲进行重组的 DNA 片段(常称为目的 DNA) 的获取;载体的选择及准备;目的 DNA 片段与载体的连接;重组 DNA 导入宿主细胞;含重组 DNA 宿主细胞的克隆化及鉴定。

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