纯化质粒降解的相关问题？

会不会是溶化质粒的时候没有放冰上？溶得太快且高浓度质粒互相撞击影响质量？如果长时间，比如几年，可以把质粒转进去菌里面，然后-80保存，后期复苏也更方便。

发生这种现象的主要原因是核酸酶污染，除了在提取时可能引入了外源核酸酶之外，质粒宿主细胞也会影响抽提质量，如果宿主菌是end A+ (TG1，BL21，HB101，JM系列，ET12567等)，这些宿主菌含有大量的核酸酶，易降解质粒DNA，假如制备的质粒需要长时间保存，则建议替换宿主细胞为endA-宿主菌(DH5α，TOP10，XL1-Blue等)，用于质粒抽提。

可能性最大的还是提取质粒过程中代入了核酸酶，然后质粒时间长了就会降解。如果后续操作反复冻融也会降解

什么东西时间长了都会降解，咱们空气中飘着好些东西呢，只要您别拿出来反复冻融，可以提前分装好，一般问题不大

一个是DNA酶使质粒降解，其他还有比如反复冻融，溶解质粒的去离子水或者Buffer不纯等多种原因。

建议抽提结束后尽快实验，低温保存，不要反复冻融，抽提结束就检测一下DNA质量。

产生这种现象的主要原因是核酸酶污染，除了在制备时容易引入外源核酸酶之外，质粒宿主细胞也会影响抽提质量，JM系列细胞中含有丰富的核酸酶活性，如果制备的质粒需要长期保存，建议更换宿主细胞，如DH5α、XL1-Blue，用于抽提高质量质粒。