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菌液pcr条带弥散,是什么原因?

相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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灵枢天问

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7 个回答

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Junego

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建议加一个阳性对照:可以确定引物、体系、程序是否有问题

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迟C迟

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菌液直接做模板,如果引物特异性不高,PCR条带就会出现弥散现象。

建议提一下DNA再做扩增,或者稀释一下菌液,浓度太高条带太亮也会造成模糊。

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汤姆卜丽波

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Marker没问题的话,应该就是样品有问题,可能是引物选择错误没有扩增出来

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Eason老歌迷

有帮助

可能有几个原因,一,是不是你的电泳槽电泳液不干净。二,跑的时候电压稳不稳定。三,你配置的pcr体系,有没有污染呢?还有退火温度和时间的掌握

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bamboopiggy

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弥散是因为菌体代入的杂质,但是看图,你这次没有阳性条带

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whilt-shirt

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几个原因:1.taq酶有问题;2.引物有问题;3.反应体系有问题

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天一湖医者

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通常是非特异扩增过多引起,提高退火温度试试PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列)

如果用PCR产物做模板的话,量太大也会有这个现象。胶没煮好也会这样

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