DNA转录技术需要注意的易错细节有哪些？

DNA的转录是不对称的，以四种NTP为前体，需要Mg2+参与。需要模板＆解链，但是不用引物。 转录有极性，从5'-3'。

所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断 DNA 的可能性。提取 DNA 过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。 要用新鲜样品或液氮冷冻-70 度保存的样品。这样通过降低内切酶的活性 DNA 的降解。

转录 模板为双链DNA,为半不连续转录，不需要引物，原料为四种NTP，足够的ATP

（1）DNA复制的模板是DNA的两条链，转录的模板是DNA的一条链。

（2）mRNA直接决定氨基酸的排列顺序，DNA从根本上决定氨基酸的排列顺序。

（3）DNA的复制和转录并非只发生在细胞核中，在叶绿体、线粒体等处也可发生。

（4）哺乳动物成熟红细胞中无细胞核和细胞器，不能进行DNA的复制、转录和翻译。

（5）转录的产物不仅有mRNA，还有tRNA、rRNA等，mRNA、tRNA、rRNA都可参与翻译过程，但是作用不同。

（6）翻译时，不会出现A—T、T—A配对方式，且在翻译过程中核糖体可以沿着mRNA移动。

（7）①氨基酸和密码子、氨基酸和tRNA不是一一对应关系。密码子共有64种，其中有3种（终止）密码子不决定氨基酸。

②每种氨基酸对应一种或几种密码子，可由一种或几种tRNA转运。

③一种密码子（终止密码子除外）只能决定一种氨基酸，且一种tRNA只能转运一种氨基酸。