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双酶切产物OD值过高可能是什么原因?

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苹果嘉尔2OUW

双酶切产物胶回收之后测浓度和吸光度,A260/280值高达3点几,可能是什么原因导致的呀

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3 个回答

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cxsm

有帮助

个人观点,酶切或pcr产物去测浓度意义不大,毕竟回收的时候跑凝胶会让你的产物不是很干净,1ug质粒回收,测出来可能其实不到0.1ug,但如果你继续拿回收的产物去跑胶,产物的亮度不会相差太大。我们平时构质粒,用20-30ul水回收,足够用很多次。

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bamboopiggy

有帮助

胶回收的260,280没法看的,只是能给你提供参考浓度,算你的插入片段和backbone的比例。

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天一湖医者

有帮助

可能的原因:1.封闭不够完全,一般37度两小时,一小时勉强行(空白OD值高跟显色时间长短,显色试剂灵敏度都有关系)
2.二抗浓度过高,孵育时间过长,都容易出现OD值偏高。

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