双酶切产物OD值过高可能是什么原因?

个人观点，酶切或pcr产物去测浓度意义不大，毕竟回收的时候跑凝胶会让你的产物不是很干净，1ug质粒回收，测出来可能其实不到0.1ug，但如果你继续拿回收的产物去跑胶，产物的亮度不会相差太大。我们平时构质粒，用20-30ul水回收，足够用很多次。

胶回收的260，280没法看的，只是能给你提供参考浓度，算你的插入片段和backbone的比例。

可能的原因：1.封闭不够完全，一般37度两小时，一小时勉强行（空白OD值高跟显色时间长短，显色试剂灵敏度都有关系）
2.二抗浓度过高，孵育时间过长，都容易出现OD值偏高。