cxsm
个人观点,酶切或pcr产物去测浓度意义不大,毕竟回收的时候跑凝胶会让你的产物不是很干净,1ug质粒回收,测出来可能其实不到0.1ug,但如果你继续拿回收的产物去跑胶,产物的亮度不会相差太大。我们平时构质粒,用20-30ul水回收,足够用很多次。
bamboopiggy
胶回收的260,280没法看的,只是能给你提供参考浓度,算你的插入片段和backbone的比例。
天一湖医者
可能的原因:1.封闭不够完全,一般37度两小时,一小时勉强行(空白OD值高跟显色时间长短,显色试剂灵敏度都有关系)
2.二抗浓度过高,孵育时间过长,都容易出现OD值偏高。