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G418 筛选小鼠支持细胞确定最佳筛选浓度时,浓度都加到 5mg/ml 了,但两周后为何不见细胞死亡?

相关实验:转染细胞的稳定筛选实验

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沧海风铃

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4 个回答

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马帅儿

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方便的话,把你设的浓度梯度和细胞show一下;首先查一下文献,大家都用的什么浓度(如果有的话),一般我们用G418筛选浓度为几百ug/ml,不会像你说的那么高的。。。
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0710314

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再等等看,不过两个星期也应该死了!可以再辅助做点有限稀释或者是流式分选,可以让细胞更纯一点,单纯的加G418压出来不太可能!
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weili2013

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一般来说G418的浓度不需要用这么高,通常的筛选实验1mg/ml应该足够,除了设计对照组外,换一下药物也是一个选择
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湖胡湖

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如果对照细胞没死,那可能是这细胞表达neo基因抗性,不然这细胞就牛掰了,这么高的浓度都不死!如果说对照细胞已经死了,那你不就是已经筛选出来了么?
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