Bodipy493/503染细胞内脂滴淬灭快？

各位大神好！我在染色细胞内中性脂质的时候用的Thermo他们家的这个脂滴染料。目前遇到了以下几个问题：

1.淬灭快。我用倒置荧光拍过，正置荧光拍过，（我们实验室共聚焦坏了还没修好）40倍镜下基本我调焦的功夫他就已经淬灭了，爬片加了抗淬灭剂也没用。老师让我找他们技术问一问，我问了，技术说是我自己荧光强度太高了，这个没有那么容易淬灭，但是我去丁香园上搜，也有朋友遇到了同样的问题，也没有处理好。这应该怎么解决呢？

2.照出来的结果不具有统计学意义。因为每个视野调焦或者其他的原因不能保证每个视野拍照的时间长度是统一的，有的拍了2s，有的拍了3s，所以它的荧光淬灭也不同，不知道哪一个才是正确的。

3.大家统计荧光强度都是用Image J吗？怎么统计呢？

感谢大神解答！快开题了一点进展都没有。。。