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科研学霸天团，48小时有问必答

问安徽医药还需要终审吗？

dxyc42u

安徽医药需要终审的，不过很快的

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问发酵液蛋白提取（求助）

sswei

样品质量不佳，蛋白质含量过低或质量不好。

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问判断坏死性凋亡和凋亡

毛利小五郎的徒弟

坏死性凋亡不同于凋亡和其他形式的程序性细胞坏死，它不依赖于 caspase 活性，但需要 RIPK3 调控的 MLKL 磷酸化。这种磷酸化事件使 MLKL 在质膜上产生孔复合体，从而导致 DAMP 的分泌、细胞肿胀和膜破裂，可以通过检测MLKL磷酸化程度检测坏死性凋亡

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问请问一下大家是如何将荧光强度的变化

dxyc42u

机器上选择自动分析结果会有的，你好好找下

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问大量提取贝类组织DNA

huarenqiang5

提取贝类组织的DNA，建议用液氮研磨比较好。

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问植物蛋白质提取方法和动物蛋白质提取方法主要有什么区别？

dxy_mqg1dtg8

以下是两种类型蛋白提取方法的主要区别：1. 细胞破碎方法由于植物细胞壁的存在，植物蛋白提取需要先破碎细胞壁才能获得细胞质中的蛋白。植物蛋白提取可以使用研钵研磨、液氮破碎、超声波处理等方法来破碎细胞壁。而动物蛋白提取则通常采用机械破碎、超声波处理、高压均质等方法来破碎细胞膜。2. 提取缓冲液植物蛋白提取需要特定的提取缓冲液，以帮助提高蛋白质的溶解度和稳定性。在植物蛋白提取缓冲液中，常添加还原剂、螯合

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问蛋白质提取率计算，关于总蛋白和提取液蛋白含量的测定方法？

sswei

考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定

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问铜绿假单孢菌MLST分析引物错配问题

毛利小五郎的徒弟

细菌是具有变异度的，先确定这篇文章中的细菌类型再查询

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问构建稳转细胞系

dxyc42u

没高表达低表达之分，pcDNA3.4可以构建稳转株的

3 回答800 围观

问请教大家，我在做vigs沉默的时候，基因没有沉默掉，反而表达量高了很多，为什么？

dxyc42u

沉默基因效率不高时会引起细胞代偿性增多

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问求lowry法测定蛋白试剂盒

balalaLy

lowry法跟BCA法检测效果差不多，经费充足可以选进口

3 回答251 围观

问收的新鲜的wnt3a CM没有活性会是什么原因?

sswei

wnt3aCM无活性原因可能是纯度不足或失活。

3 回答219 围观

问流式咨询：细胞染色后来不及做怎么处理

huarenqiang5

如果短时间保存，可以放在4℃进行保存。

3 回答1318 围观

问油脂添加到细胞中，能融合在一起嘛

sswei

油脂还能用水溶性界面活性剂：如十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠等溶解。

3 回答334 围观

问求助，流式细胞染色检测cd8+t和iNKT细胞

dxyc42u

可以直接加这两个染料染色的，只要染的好流式一般没啥问题

3 回答250 围观

问求助|小鼠脑冰冻切片

sswei

问题根源在于固定液和蔗糖液配置，一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构，所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时，要掌握好温度，不易过低或过高。

2 回答1283 围观

问培养的3T3成纤维细胞形态不好是什么原因？

sswei

细胞密度较高的情况下，细胞可能倾向于保持未分化状态，从而导致细胞形态不好。

4 回答338 围观

问要做荷瘤鼠，请问打细胞前最多传多少代？？

huarenqiang5

你这传11代一般来说没有什么影响。

4 回答420 围观

问求modfit的横纵坐标可调整的版本

毛利小五郎的徒弟

把纵横比固定的选项取消掉就可以调整了

2 回答1082 围观

问小鼠胆结石模型计算胆固醇饱和指数的时候

sswei

胆固醇甘油三酯运输需要磷酯等包被，在测定胆固醇饱和指数前要测磷酯。

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