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【进展】Science: 美实现单个抗体绑定到2种不同抗原

美国科学家近日通过研究,打破了一个古老的免疫学教条——一个抗体只能绑定到一个抗原上。他们成功地使一个抗体紧密地绑定到两个不同的抗原上。相关论文发表在3月20日的《科学》杂志上。这一抗体作用于2种蛋白——血管内皮生长因子(VEGF)和人类表皮生长因子受体2(HER2),前者被认为会促进肿瘤的生长,而后者则在一些侵略性的乳腺肿瘤里高表达。科学家以前经常发现一些抗体能够松散地绑定到多个抗原上,但一直没有发现或通过操作实现 ...

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(交流)SELEX技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)

请规范发贴,否则删贴,谢谢合作。抗体是机体免疫系统中最重要的效应分子,具有结合抗原、结合补体、中和毒素、介导细胞毒、促进吞噬和通过胎盘等功能,发挥抗感染、抗肿瘤、免疫调节与监视等作用。抗体的研究始于18世纪末,即1890年德国学者Von Behring证明免疫动物血清中存在抗毒素(抗体)。随后又相继发现了凝集素、沉淀素、溶血素、溶菌素和补体结合素等。随着DNA结合蛋白研究的深入,受组合化学、抗体库和随机噬菌体肽库技术的启发 ...

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(共享)免疫组化小贴士

1.固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较好,结构完整,但因偏酸,对抗原有一定损害,且组织收缩明显,不适于组织标本的长期保存。PLP液:即高碘酸钠-赖氨酸-多聚甲醛,适于固定石蜡 ...

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【共享】免疫组化常见问题的处理

免疫组化常见问题的处理免疫组化常见问题的处理当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配; ...

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(共享) 免疫组化基础知识

免疫组织化学的概念:免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验所用的抗体有哪些?免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动 ...

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(共享)免疫组化操作规程

(一)、仪器设备1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;2)水浴锅(二)、试剂1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L。2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。3)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L N ...

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(共享)ELISA的原理和方法

ELISA的原理和类型1. ELISA的原理  ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的 ...

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(共享)ELISA技术大全

LISA技术的-操作要点  优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。4.1 标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清) ...

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【共享】冰冻切片的免疫组化染色操作步骤

1. 新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片( 也可- 80℃保存),厚度为 5~6m。 2. 载玻片可不打底,裱片后,立即用电吹风吹干。 3. 如不马上染色,可密封后- 20℃保存。 4. 染色前用冷丙酮在 4℃固定 10-20 分钟。 5. PBS 洗 2 次,每次 5 分钟,( 必要时应用 0.1%柠檬酸钠+0.1%triton打孔)1. 新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片( 也可- 80℃保存),厚度为 5~6μm。2. 载玻片可不打底,裱片后,立即用电吹风吹干。3. 如不马上染色,可密封后- 20℃保存。4. 染色前用冷丙酮在 4℃固定 10-20 分钟。5. PPS洗 2 次,每次 5 分钟,( 必要 ...

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【交流】流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光 ...

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【共享】白内障晶体混浊分类系统

一、LOCS II 晶状体混浊分类标准二、LOCS II 晶状体混浊分类标准LOCS Ⅱ也采用了裂隙灯晶状体断面彩色照片及Neitz后照明彩色照片分级,核性白内障标准照片分4级(N0、N1、N2、N3),皮质性白内障标准照片分5级(Ctr、CI、CII、CIII、CIV),后囊下型白内障标准照片分4级(P0、PI、PII、PIII)。LOCS II的局限性是各级别之间间隔不等、核的颜色分级仅一个标准、采用整数分级、95%容许限(95% tolerance ...

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【共享】常用抗体标记荧光染料的选择

常用抗体标记荧光染料的选择随着免疫荧光技术的不断发展,荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前,市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列 (Life technology, USA); DyLight系列;Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为AlexaFluor®系列和CFTM系列。CFTM系列染料的核心对比AlexaFluor® ...

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【共享】关于荧光三标如何选择抗体?

关于荧光三标如何选择抗体?做免疫荧光实验中,经常要进行免疫荧光的双标记实验,也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时,可以选择不同来源的一抗,然后再选择分别针对一抗的二抗,同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里,都会选择一个绿色的(如FITC、Cy2、Dylight 488等)荧光标记,一个红色的(如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等)的荧光标记。 ...

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ELISA的原理和类型

第三节 ELISA的原理和类型  一、基本原理  1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标 ...

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免疫缺陷病的检测方法

由于免疫缺陷病涉及细胞免疫、体液免疫、吞噬功能和补体系统等多方面的原因,因此其检测方法也是多方面、综合性的;有体内试验,也有体外试验;有功能试验,也有细胞表面标志的检查。一、淋巴细胞计数和外周血像检查淋巴细胞计数可采用直接计数或百分比法,这是最简便而直接的免疫缺陷检查。成人外周血淋巴细胞的正常值为1.5×109~3×109/L,小儿略高于成人。不论什么年龄,如低于1.2×109/L应考虑为细胞免疫缺陷病。原发性免疫缺陷常 ...

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【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?

检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP标签系统等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检 ...

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[分享] HIV分子免疫学(PDF格式)电子书下载

HIV分子免疫学(PDF格式)电子书下载IntroductionTable of ContentsPrefaceHIV-1, HIV-2, and SIV Genome MapHIV/SIV ProteinsCommon Abbreviations used in this databsePart I. Review ArticlesThe Evolving Field of HIV CTL Epitope Mapping: New Approaches to the Identification of Novel Epito ...

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(共享)抗原修复方法

不错的抗原修复方法,大家共享。Proteolytic antigen retrieval using TrypsinReagents:Calcium Chloride 0.1gTrypsin (Sigma Type II) 0.1gDistilled Water 100 mlSodium Hydroxide (0.1 M)Method:1.Dissolve calcium chloride in distilled water and pH to 7.8 with sodium hydroxide. Store at 37oC.2. D ...

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【翻译】Development trends for monoclonal antibody cancer therapeutics

Evolution of production methodsThe total number of anticancer mAbs in clinical study by companies has risen steadily over time. In fact, the rate at which new oncology mAbs entered clinical study sponsored by commercial organizations has more than tripled since the 1980s, from 4.3 per year in the ...

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免疫技术

一点小东西希望对大家有些用处We improved this resourceThis page was translated from french toit is now finalizedThank you for any commentIMMUNOLOGICAL TECHNIQUESTools and TechniquesMolecular Immunology Antibodies. Antibody uses: Elisa, Nephelometry, RadioimmunologyCell ...

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