【交流】CCK-8替代MTT

在生物江湖过了这么多年，懂行的人都知道检测细胞活性、凋亡、毒性方面有着各式各样的试剂和方法。而大都有预见性地肯定道CCK-8法是目前最具潜力和优势的细胞活性毒性检测方法。那为什么较早期传统的MTT法，CCK-8法会此被科研和药厂等相关实验人员看好呢？今天就这个方面来和大家做个交流，给点鄙人的见解。
不可否认，曾经MTT法的出现使各实验人员为之振奋。因为MTT法较当时其他细胞活性检测有不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测等优势，随即MTT势不可挡地成为细胞活性检测的主流方法。需知，长江后浪推前浪，辩证地讲，没有什么会亘古不变。而目前CCK-8就以后浪的角色逐渐活跃在生物细胞检测的舞台上，它的一出现就极大地受到我们实验人员的青睐。相比MTT法和CCK-8法，原理是相同的，都是先用试剂将细胞内的脱氢酶还原成甲臜，通过甲臜数量的检测就可以反映细胞的活性。这两者主要的不同就在于MTT法甲臜产物不溶于水，检测它必须先用有机溶剂溶解，而CCK-8法甲臜产物是水溶性的。这能明显看出CCK-8的优势，姑且不讲溶解甲臜的有机溶剂对实验人员有怎样的毒性，光是实验操作步骤、周期、便捷等就有巨大优势，能效地减少实验过程的污染，增强实验结果的说服力。更何况MTT法操作对细胞的毒性是不能忽略的，而CCK-8法对细胞基本无毒性。大家也许都听过日本同仁的CCK-8产品，确实很强大，没什么说的。而国内也有一些新起之秀，在这方面做得强大就属上海七海复泰生物了，他们家CCK-8分为三种型：标准、增强、低毒。标准型对比同仁的研发推出，质量基本一致；而增强型针对需要快速显色的细胞，并且其OD值强于同仁产品；低毒型针对对外来化合物敏感的细胞，在加入同等试剂后，10小时内对细胞生长活性无影响。都说这是个生物的世纪，我置身其中感受着它高速的发展，通过我们实验室对比的实验，我仿佛看到了国产品牌的希望。又扯远了，给张各细胞检测方法的比较表，能让大家更直观地了解：

<center> <strong>检测方法</strong></center>	<center> <strong>MTT法</strong></center>	<center> <strong>XTT法</strong></center>	<center> <strong>WST-1法</strong></center>	<center> <strong>CCK8法</strong></center>
<center> 甲臜产物的水溶性</center>	<center> 差（需加有机溶剂溶解再检测）</center>	<center> 好</center>	<center> 好</center>	<center> 好</center>
<center> 产品性状</center>	<center> 粉末</center>	<center> 2瓶溶液</center>	<center> 溶液</center>	<center> 1瓶溶液</center>
<center> 使用方法</center>	<center> 配成溶液后使用</center>	<center> 现配现用</center>	<center> 即开即用</center>	<center> 即开即用</center>
<center> 检测灵敏度</center>	<center> 高</center>	<center> 很高</center>	<center> 很高</center>	<center> 高</center>
<center> 检测时间</center>	<center> 较长</center>	<center> 较短</center>	<center> 较短</center>	<center> 最短</center>
<center> 检测波长</center>	<center> 560-600nm</center>	<center> 420-480nm</center>	<center> 420-480nm</center>	<center> 430-490nm</center>
<center> 细胞毒性</center>	<center> 高，细胞形态完全消失</center>	<center> 很低，细胞形态不变</center>	<center> 很低，细胞形态不变</center>	<center> 很低，细胞形态不变</center>
<center> 试剂稳定性</center>	<center> 一般</center>	<center> 较差</center>	<center> 一般</center>	<center> 很好</center>
<center> 批量样品检测</center>	<center> 可以</center>	<center> 非常适合</center>	<center> 非常适合</center>	<center> 非常适合</center>
<center> 便捷程度</center>	<center> 一般</center>	<center> 便捷</center>	<center> 便捷</center>	<center> 非常便捷</center>