【共享】抗体保存指南
丁香园论坛
1770
抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维
持数月甚至数年。
本指南以 abcam 抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗体产品!
请谨记!无论何时
请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!
1、 收到抗体后请务必在 12000rpm 离心 1-5分钟后再打开管盖进行分装和保存!
Abcam 的抗体使用非常特殊的储存管,只有在12000rpm离心1-5分钟才能将附着在管壁或盖内的抗体全部
离心下来。即使是在10000rpm离心也会导致离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象!
2、 对于 abcam大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20度 or -80度 。
? 对绝大多数抗体来说,保存在-20度是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80度会有更多的好处!
? 分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
? 分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于 10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响
? 复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在 4度,避免再冻起来!
? 抗体工作液应该当天配制当天用完,在 4度尽量不要超过1 天。
? 绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。
3、 大部分抗体收到后 4度 短暂保存 1-2周对抗体活性是没有影响的。
如果抗体很快(1-2 周)会使用,推荐在 4度保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则最好是在-20度 or -80度。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体!
但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4度保存会导致抗体的降解!
4、 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要 1-2周的时间,所以是在 4度的条件下来完成的。
4度 运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来
的,为了分装就需要解冻。这就多了一次冻融的过程)。所以运输过程中绝对避免干冰运输!
特殊抗体的保存条件:
1) 酶联抗体:永远保存在 4度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失
2) 偶联抗体:所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光4度保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,
因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!
3) IgG3 的同型对照:永远保存在 4度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!
持数月甚至数年。
本指南以 abcam 抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗体产品!
请谨记!无论何时
请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!
1、 收到抗体后请务必在 12000rpm 离心 1-5分钟后再打开管盖进行分装和保存!
Abcam 的抗体使用非常特殊的储存管,只有在12000rpm离心1-5分钟才能将附着在管壁或盖内的抗体全部
离心下来。即使是在10000rpm离心也会导致离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象!
2、 对于 abcam大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20度 or -80度 。
? 对绝大多数抗体来说,保存在-20度是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80度会有更多的好处!
? 分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
? 分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于 10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响
? 复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在 4度,避免再冻起来!
? 抗体工作液应该当天配制当天用完,在 4度尽量不要超过1 天。
? 绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。
3、 大部分抗体收到后 4度 短暂保存 1-2周对抗体活性是没有影响的。
如果抗体很快(1-2 周)会使用,推荐在 4度保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则最好是在-20度 or -80度。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体!
但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4度保存会导致抗体的降解!
4、 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要 1-2周的时间,所以是在 4度的条件下来完成的。
4度 运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来
的,为了分装就需要解冻。这就多了一次冻融的过程)。所以运输过程中绝对避免干冰运输!
特殊抗体的保存条件:
1) 酶联抗体:永远保存在 4度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失
2) 偶联抗体:所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光4度保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,
因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!
3) IgG3 的同型对照:永远保存在 4度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!