近日浏览 Lancet 网页，其主页放了一篇关于儿童克罗恩病（Crohn's Disease，CD）的队列研究，笔者并非消化内科相关，而是呼吸内科一年级研究生，抱着建模方式或许可以借鉴到老师的临床研究项目中的心态入了坑。图一，3 月 15 日 Lancet 的主页截图本文针对儿童克罗恩病并发症预测的多中心的队列研究，来自于 RISK Study。现在大多数 SCI 杂志对于临床研究接稿都要求试验开展前已进行临床试验注册，收完病人再去补是无济于事的。图二，临床 ...
实践篇——知其然扎细胞的基本操作步骤：配好 ACSF 充氧（tip：氧要饱和！根据实验对象、目的、课题设计等各种主客观情况选用合适的方法技术）打开各种仪器。基本就是循环灌流系统（简单地说就是蠕动泵，使脑片记录槽中氧饱和的人工脑脊液不断更换，可防止脑片细菌滋生）、显微观察系统（tip：Olympus、Zeiss 等官网可以了解很多相关知识）、记录采集系统三大模块。（tip：在记录槽充满溶液的时候再打开加热器，干烧容易把电阻烧坏；先开硬件 ...
如何寻找一个基因的启动子并预测转录因子在其上的结合位点是一个不小的工程，原因有二：1. 网络上有海量的寻找启动子的教程，各执一词，常常会让小白不知所措；2. 同理，转录因子的数据库也有很多，而且不少已经鲜有维护，数据陈旧，使用起来很不方便。有没有一个数据库能完美地一次解决这两个问题呢？有的！今天给大家介绍的 LASAGNA-Search 2.0 便是一款十分让你省心的在线分析数据库。一、首先，打开数据库的网址：http://biogrid- ...
本文讲述一篇 SCI 论文的标题如何书写。SCI 论文的标题应该以最恰当、最简明的词语来反映论文中最重要的特定内容，因此，必须用心斟酌选定。SCI 论文的标题（Title）又称为「题目」、「题名」或「文题」，是该论文的重要组成部分。有的标题还包括副标题或引题 。一篇 SCI 论文一般还有若干段落标题，也称为层次标题或小标题 。一般而言，写好 SCI 论文的标题还是很难的。但是实际上很多人写论文标题时，并不很重视，往往写得不准确、不恰当，从而影响整个论文的形象 ...
大家都在说 qRT-PCR 实验原理、引物设计、结果解读等，而我觉得我应该和大家分享一下 qRT-PCR 的实验操作事项。虽小，但是关乎结果。在做 qRT-PCR 之前，我们需要对自己的 RNA 以及操作方法有清楚的了解，毕竟我们的努力是希望得到结果的，而不是简单的练练手。所以在做 qRT-PCR 之前，我们需要确定以下问题（部分内容仅适用于 SYBR）。你确定你的 RNA 没有降解吗？NanoDrop 2000 只能检测 RNA 的浓度以及纯度，而对于 RNA 的完整性是没法检测的。RNA（ ...
实验篇1.师姐：等会儿做细胞，准备点 ps。我愣了一下：photoshop？（后来才知道是双抗……）2.某次大处理，x 师兄说小鼠碧绿的胆囊像翡翠，x 师姐立马接口说那分离肠段的就是拉面条的，后来发现目内眦取血时，小鼠的眼球像黑珍珠一样圆润漂亮。3.另一次大处理，打开小鼠腹腔一看，胆囊萎缩得没有了，x 师姐说是看到 X 老师（动物实验牛人），吓破胆了……4.x 同学小鼠灌胃每天死一只，x 师姐说这就像演柯南，每集死一只。终于有一天 x 同学的小鼠没灌死，x 师姐的竟然死 ...
写在前面的话本文是一篇脊柱领域系统评价，成文后自我评估不甚看好，理由有三：1. 阴性结果一般不受待见2. 中文文献偏多3. 纳入文献质量偏低先后投稿以下七个期刊，最终被 AOTT 接受。European Spine Journal（2.132，投稿时 IF，下同）Clinnical Orthppaedics and Related Research（3.127）International Orthopaedics（2.387）Acta Orthopaedica Belgica ...
最近，85 后女博士连续在 Cell、Nature 发文又刷遍了朋友圈。每次这样的励志故事总是很受欢迎，年轻、牛文、多篇牛文，这样的组合非常符合当下的科研 环境。但是这样的故事真的适合所有人吗？普通人该怎么看呢？85 后女博士她叫华甜，上海科技大学 iHuman 研究所和中科院生物物理研究所联合培养的博士研究生，85 后。2016 年，她以第一作者身份在《细胞》发表了论文，不久前，也就是 2017 年 7 月 6 日凌晨，她又以第一作者身份在《自然》发表论文。成功背后的故事时间 ...
插入参考文献后，无论如何修改参考文献的格式，第二作者都是简写（首字母缩写）如下图，第二作者 Ivania 在参考文献中被显示为简写，以首字母缩写的形式存在，即红圈重点 I. 这样应该如何解决呢？究其原因，上述现象的出现是因为 EndNote 软件本身对导入的文献格式要求较高，而上述问题往往会被使用者所忽视，具体原因见下图。问题的原因在于，参考文献导入软件时，作者栏的第一作者和第二作者并排了，这样会导致软件识别错误，进而导致上述问题。解决的 ...
充分的准备是实验成功的关键，那么，qPCR 实验需要提前做好哪些了解呢？试剂的储存条件市面上大多数 qPCR 试剂推荐 - 20 ℃ 避光长期储存。Vazyme 的 ChamQTM 和 AceQ? 两个系列的 qPCR Master Mix，长期储存应置于 - 20 ℃ 避光，解冻后可于 4 ℃ 短暂存放；避免反复冻融。原始模板稀释倍数—是不是拿到一个 cDNA 模板就直接做 qPCR？—NO!—是不是拿到一个 cDNA 模板就直接做 qPCR？—NO!—是不是对怎么确定稀释倍数倍感无助？……尽量选择 Ct 值落在 15-28 范围的稀释倍数作 ...
做感受态的小女孩刚进实验室，师兄就神秘兮兮的对我说，「小师妹啊，师兄我最近要做一项非常伟大的研究，非常需要你的协助。」我：「（星星眼）好哇，要我做什么？」师兄：「听好了啊，师兄我要将扩增好的启动子序列重组到载体中，再将这个重组 DNA 分子导入细菌体内进行表达喔，是不是非常伟大？」我：「（继续星星眼）嗯嗯」师兄：「这个艰巨的任务现在就交给你啦，很简单的，你先做个感受态出来，再将我构建的质粒转进去就好了。"我：「..........（感受态是什么鬼，能 ...
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 So ...
一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中2、 采血后室温静置1小时3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉 淀。 4、 取上清。 分装冻存备用， 2-8℃下，可放置保存24-48小时； -20℃下，可放置保存1个月； -70℃下，可放置保存6个月5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注 ...
对于刚入门的科研小白，免疫组化步骤较为繁琐，而且一步错，步步错，有时候明明觉得自己都按照老师们提供的条件做，可惜就是没有得到预期结果，现我将自己的些许体会分享如下。关于免疫组化的定义，原理，分类，优势等不再一一介绍（丁香园等主流平台都有介绍），我只叙述我认为「比较小」的问题，但这些往往决定了成败，遗憾的是我检索了比较多的资料，都没有详细的提及这些问题。1取材与制片① 一定要按照标本的标本留取要求留取，譬如某组织要求固定前 ...
一些期刊对于稿件的要求还包括了 Graphical Abstract，即图文摘要，用来清晰、简洁地展示研究工作最主要的信息，与论文标题同样重要。尤其是一些影响力大的顶级期刊，大部分都会要求作者提供。有的作者对于论文写作还能从容应对，但制作一张美观且符合审稿人和读者口味的 Graphical Abstract 却着实被难住了。一旦期刊要求他附加提供一张图文摘要的时候，其内心是崩溃的。关于制作图文摘要的注意事项，我们在此提供以下 6 点建议 ...
引言医学综述论文日益受到人们的关注，也变得越来越不可或缺。面对大量的科学出版物，「紧跟文献」已经成为很多人难以逾越的障碍，因此研究人员和临床医生们亟需综述论文。随着综述文章涵盖内容的增加，其质量和可靠性的重要性也随之加强。一篇可靠的综述，不仅会描述其信息的来源和方法的选择，阐明支持关键观点的证据类型和支持力度，也同时会申明来源、成果及利益冲突 。医学综述论文分类本论述所讨论的仅限于医学综述论文，不涉及其他科学领域内 ...
研究论文的讨论部分使作者有机会深入阐述自身的工作，描述其创造性内容和独特见解，并将其发现与现有知识进行比较，承认其局限性，并为进一步研究提出问题。不幸的是，讨论部分往往具有严重的缺陷——作者可能过分夸张或赞美自身的工作；进行过多的文献综述；不必要地重复引言中提供的研究背景；重复给出结果部分中的数据；讨论冗长、篇幅过长。实际上，讨论应该紧紧围绕研究主题。以下是我们关于讨论部分写作的具体说明性的建议：讨论部分，应以阐述 ...
啊啊啊，要怎么样才能 KO 肿瘤小怪？急求，在线等！--日夜奋斗的医学君「嘿嘿，让小编来拯救陷于水火中的你，教你如何四步打败肿瘤小怪，顺利升级。第一步：体细胞变异检测，知己知彼方能百战不殆。第二步：易感基因筛查，铺开战线，地毯式搜索。第三步：NMF 突变频谱和突变特征分析，搞清局势，开始攻城略地。第四步：高频突变基因统计及通路富集分析，见缝插针，顺利 KO！小伙伴们，看明白了吗？贴心的小编将结合真实案例，为大家详细讲解肿瘤对抗攻略，Let's go ...
随着中药科技的不断发展，近年来出现了诸多新技术、新方法，如中药分离纯化技术与测试、仿生提取法、高速离心分离技术等。这些新技术和方法的应用，使得中药分离既符合传统的中药理论；又能达到高效分离和纯化的目的，本文简要介绍了该方法原理及具体的实操方式（实例），这些技术在中药分离纯化的研究方面有着重要的参考价值和运用意义。一、标准物质研究1、指纹图谱研究2、特征成分制备分离3、结构鉴定4、标准物质稳定性研究二、生产工艺研究小试 ...
据估计，因抗体质量不佳， 生命科学领域每年的损失达到 8 亿美元。这也造成了无数的实验失败，浪费了宝贵的资源和科学家的时间。尽管科学界已经意识到这个问题，但目前仍然缺乏抗体验证的整体框架。为了刺激研究界实现更高标准的抗体重复性，国际抗体验证工作组（IWGAV）于 2016 年 9 月份出台了一套抗体验证指南并发表在《Nature Methods》杂志上， 题为「A Proposal for Validation of Antibodies」, 强调了抗体验证需要针对应用和 ...
