荧光素
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荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光,停止能量供给,发光也瞬时停止(一般持续10-7~10-8s)。可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光色素。目前主要常用的荧光色素有以下3种:
(一)异硫氰酸荧光素(Fluorescein
isothiocyanate, GITC)
呈黄色、橙黄或褐黄色粉末或结晶,性质稳定,在室温下能保存2年以上,在低温中可保存多年。易溶于水和酒精。最大吸收光谱为490~495nm,最大发射光谱为520~530nm,呈现黄绿色荧光,分子量为398.4(图3-5)。
在碱性条件下,FITC的异硫氰酸基在水溶液中与 免疫球蛋白 的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键,成为标记荧光 免疫球蛋白 ,即荧光 抗体 。反应式如下(图3-6):
一个Ig分子上最多能 标记15~20个FITC分子。
图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱
图3-6 抗体 的FITC标记反应式
(一)异硫氰酸荧光素(Fluorescein
isothiocyanate, GITC)
呈黄色、橙黄或褐黄色粉末或结晶,性质稳定,在室温下能保存2年以上,在低温中可保存多年。易溶于水和酒精。最大吸收光谱为490~495nm,最大发射光谱为520~530nm,呈现黄绿色荧光,分子量为398.4(图3-5)。
在碱性条件下,FITC的异硫氰酸基在水溶液中与 免疫球蛋白 的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键,成为标记荧光 免疫球蛋白 ,即荧光 抗体 。反应式如下(图3-6):
一个Ig分子上最多能 标记15~20个FITC分子。
图3-5 FITC的吸收光谱和发射光谱
图3-6 抗体 的FITC标记反应式