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双荧光素酶报告基因实验为什么萤火虫荧光素酶能比海肾素荧光素酶低吗发光信号?

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dxy_n4jex0k8

用的是promega的E1960。转染用碧云天lipo8000。larii分装到避光小瓶中放-80差不多一个礼拜,拿出来放37度融化的。

细胞铺得量挺合适的,也培养了超过24h才转染。

哪怕是同一批细胞一起铺的板,都是对照组,一块板是加了stop-glo后降低,一块是升高。

一般是哪儿出问题了呢?理论上加了stop-glo后一定会下降吧?因为海肾素荧光素酶弱很多。

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2 个回答

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土井挞克树

有帮助

加量以及荧光保存是否有差别,避光了吗。

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bamboopiggy

有帮助

你用的是检测双荧光素报告酶系统的机器吧?萤火虫荧光素酶产生的光颜色呈现黄绿色,波长550-570nm;而海肾荧光素酶产生蓝光,波长480nm。没有弄错波长?

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dxy_n4jex0k8user-title

它是生物发光,全波长采集的呀?只要是白色平底板子就能全部反射发光并且互不干扰呀。

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