【求助】一个关于萤火虫荧光素酶报告基因的问题?
丁香园论坛
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各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。
做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。
问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。
因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。
谢谢。
做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。
问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。
因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。
谢谢。
好像现在比较常用的是双报告基因检测吧,可以解决你说的问题
利用双荧光素酶报告基因系统
同时转入内参质粒
同时转入内参质粒
huxueliang
麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦!
麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦!
promega公司的双荧光素酶标记系统,好多人都在用,同时转入要检测的报道基因及Renillia,操作的话说明书上有的
双荧光系统就是有一个内参,是renilla,它的强度可以表征细胞量和状态对转染效率的影响……最近刚刚开始做这个,数据的荧光值好低啊,郁闷………………
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